Preambolo
Il Prof. Luc MONTAGNIER in marzo, agosto e recentemente (France-Soir) ha presentato l'ipotesi che Sars-Cov2 potesse essere il risultato di una sfortunata e accidentale fuoriuscita di uno "pseudovirus" cioè prodotto in laboratorio e molto probabilmente per scopi di sviluppo di vaccini legittimi.
L'argomentazione del Prof. MONTAGNIER è principalmente scientifica, ovvero la presenza nella sequenza genomica dell'RNA di Sars-Cov2, sequenze molto brevi di altri virus (HIV), in posizioni molto specifiche della catena dell'RNA di Sars-Cov2 questo il che “statisticamente” renderebbe la probabilità di avere naturalmente queste sequenze in queste posizioni, molto bassa rispetto alle attuali conoscenze di ricombinazioni e mutazioni dei coronavirus di tipo Sars .
Tuttavia, gli autori desiderano semplicemente presentare fatti documentati , diversi dal francese, per quanto riguarda i riferimenti che confermano la realtà di numerosi articoli di numerosi laboratori che negli ultimi 20 o 30 anni hanno effettivamente creato "pseudovirus" e vettori virali, molti dei quali hanno combinato il virus HIV e la Sars, in particolare sulle funzioni chiave di " binding ", " membrane fusion " e " cleavage " che, casualmente o manipolate in laboratorio, sono esattamente le 3 funzioni delle sequenze "uniche" di Sars-cov2
Il secondo articolo di riferimento anch'esso basato su precisi elementi genetici e che si concentra principalmente su " come spiegare la Sars con un'evoluzione naturale " è quello di Alina CHAN nel maggio 2020 , più o meno contemporaneamente a quello del professor Montagnier.
"Le nostre osservazioni suggeriscono che quando SARS-CoV-2 è stato rilevato per la prima volta alla fine del 2019, era già pre-adattato per la trasmissione umana in misura simile al tardo focolaio di SARS-CoV. . Tuttavia, non è stato rilevato alcun precursore o evoluzione da un virus meno adatto all'uomo a SARS-CoV-2.
Rispetto all'epidemia di SARS-CoV, l'epidemia di SARS-CoV-2 sembra mancare di una fase iniziale in cui ci si aspetterebbe che il virus accumuli mutazioni adattive per la trasmissione umana.
"I genomi SARS-CoV-2 nei campioni di mercato di Wuhan erano molto probabilmente da esseri umani infettati da SARS-CoV-2 che erano fornitori o visitatori del mercato"
Alina Chan mantiene le 3 opzioni; direttamente un virus fabbricato o iniezione indiretta in un animale da laboratorio; o un'infezione umana in laboratorio
"Anche la possibilità che un precursore non geneticamente modificato si sia adattato all'uomo durante i suoi studi di laboratorio dovrebbe essere considerata, qualunque sia la possibilità o la possibilità"
introduzione
Gli autori rifiutano l'opzione presentata da un video che suggeriva che l'Institut Pasteur Paris fosse il creatore di Sars - Cov2, su un brevetto avviato nel 2004 e completato nel 2011 .
Inoltre nel 2003 c'erano brevetti ancora più espliciti, ad esempio:
Ma è interessante notare qui diversi punti menzionati da questo brevetto dell'Institut Pasteur, come molti altri brevetti e articoli dell'epoca. Il brevetto dell'Institut Pasteur menziona nel 2004:
" Inoltre, l'analisi filogenetica mostra che SARS-CoV è distante da altri coronavirus e che non è apparso né per mutazione dei coronavirus respiratori umani né per ricombinazione tra coronavirus noti (per una revisione, vedere Holmes, JCI , 2003, 111, 1605-1609 ) "
Questo riconoscimento apre legittimamente una questione sull'origine della Sars-Cov1 e quindi legittimamente anche sulla Sars-Cov2 , senza alcuna controversia o giudizio.
" Gli inventori descrivono un vettore di espressione comprendente un acido nucleico comprendente un gene sintetico per l'espressione ottimale della proteina S , il quale vettore è contenuta nel ceppo batterico depositato presso il CNCM il 1 ° dicembre 2004 al n I-3333 "
" I termini" isolato o purificato "significano modificato" dalla mano dell'uomo "dallo stato naturale; in altre parole, se un oggetto esiste in natura, si dice isolato o purificato se è stato modificato o estratto dal suo ambiente naturale ”. Gli inventori descrivono anche un vettore di clonazione e / o espressione ricombinante, in particolare un plasmide, un virus, un vettore virale o un fago comprendente un frammento di acido nucleico come definito sopra. Preferibilmente, detto vettore ricombinante è un vettore di espressione in cui detto frammento di acido nucleico è posto sotto il controllo di elementi che regolano la trascrizione ela traduzione appropriata "
" Gli inventori descrivono anche un vettore lentivirale che codifica per un polipeptide della famiglia della proteina S, come definito sopra "
Tutti questi termini, test, descrizioni e campioni sono comuni a molti articoli dell'epoca e provengono da molti paesi, università e laboratori. Dimostrano (qui 2004) la manipolazione su larga scala da parte dell'uomo; da un lato l'isolamento di brevi sequenze di geni virali, in particolare associati alla proteina S; e dall'altro dall'utilizzo di un vettore virale ricombinante, il cui scopo è quello di “ controllare ” la trascrizione e la traduzione.
Il rilascio accidentale di virus non è una novità.
Inserimento genetico e vettore virale: 30 anni di esistenza
I richiami del brevetto Pasteur del 2004 vengono qui presentati semplicemente per confermare che nel 2004 scienziati di diversi paesi avevano identificato e manipolato gli estratti genetici; Virus a DNA quindi virus a RNA; sequenze coinvolte in tale o tale funzione e hanno sviluppato la loro "purificazione" e inserimento nei vettori del lentivirus, inclusa la proteina S sulla sua funzione di attacco e fusione di membrana e le funzioni di trascrizione e traduzione (per la replicazione ).
Per quanto riguarda l'RNA messaggero (mRNA), i primi esperimenti hanno avuto luogo prima del 1990
"In questo articolo, descriviamo come la replicazione dell'RNA può essere" indotta "nel riconoscere i collegamenti e la replicazione dell'RNA dei messaggi delle cellule ospiti. Nel nostro sistema, il gene che codifica per la Q beta replicasi è espresso da un plasmide vettore presente in un ospite di Escherichia coli, mentre un secondo plasmide dirige la trascrizione di un modello di replicazione competente per RNA, come un fago. Questo trascritto di 680 nucleotidi (N-RNA) contiene sequenze specifiche richieste per la funzione della replicasi Q beta. Questo modello di RNA include una sequenza di 360 nucleotidi che è complementare all'RNA messaggero per la proteina lambda N del batteriofago del DNA "
Di conseguenza, nel 2012, la tecnologia dell'mRNA è ampiamente studiata e praticata in tutto il mondo, per lo sviluppo di vaccini in particolare per analizzare la reazione degli anticorpi.
“In generale, l'mRNA presenta una promettente classe di molecole terapeutiche che ha il potenziale per diventare la base di una 'tecnologia dirompente'. Di seguito, evidenziamo ciò che deve essere considerato quando si sviluppa la tecnologia del vaccino a mRNA toccando argomenti importanti come la produzione di mRNA e la qualità, il formato e la formulazione dell'mRNA. mRNA così come l'espressione e l' espressione di antigeni e proteine e le proprietà immunologiche dei vaccini a mRNA "
Nel 2020, un articolo riassume in modo esaustivo la storia delle manipolazioni di DNA e RNA per 30 anni:
La frase riassuntiva per i virus " single strand RNA (+) " di cui Sars-Cov2 fa parte è autoesplicativa;
“ In sintesi, queste osservazioni sperimentali dimostrano la natura deleteria degli inserimenti genetici nei virus ssRNA (+), dove genomi altamente razionalizzati limitano lo spazio della sequenza per l'evoluzione di nuove funzioni e, a sua volta, l'adattamento ai cambiamenti ambientali. "
Quindi, se i coronavirus sono effettivamente suscettibili a un alto tasso di errore (la polimerasi) e una facilità di ricombinazione tra loro per la loro lunghezza (che a lungo termine, a discrezione del caso, consentirebbe l'emergere della transizione verso man) sono molto poco inclini ad evolversi fortemente verso nuove funzioni e nuovi "ospiti", e al contrario a concentrare le loro funzioni principali in poche sequenze brevissime e in posizioni ben precise , sequenze molto deleterie se modificate o cancellate.
È su questa evidenza che i coronavirus ssRNA (+) sono diventati vettori virali di riferimento e che gli inserimenti di " inserti esterni corti (HIV, Ebola, ecc.)" In posizioni specifiche sono diventati " pratiche genetiche avanzate comuni " .
È un po 'come il dottor Jekyll e il signor Hyde, usiamo l'opportunità dei coronavirus che consentono, mediante inserimenti su poche sequenze molto brevi, di modificare " di un ordine di grandezza " tale o tale azione specifica del virus "ingegnerizzato", ma siamo anche esposti alla minaccia dei coronavirus ... che dopo un po 'di tempo, una delle tante mutazioni o ricombinazioni in queste brevissime sequenze ha un effetto deleterio imprevisto
Si noti anche questo articolo del 2019 che conferma che le funzioni chiave che controllano il livello dei cosiddetti effetti di espressione (cioè di azione del virus, o del vaccino se contiene filamenti di mRNA) si svolgono su poche posizioni specifiche della catena geni del virus:
L'MRNA ha il potenziale per rivoluzionare la vaccinazione, le terapie di sostituzione delle proteine e il trattamento delle malattie genetiche. Sin dai primi studi preclinici degli anni '90, sono stati compiuti progressi significativi nella traduzione clinica delle terapie a base di mRNA grazie ai progressi nella progettazione della fabbricazione di mRNA e nei metodi di somministrazione intracellulare.
La " traduzione" e la stabilità dell'mRNA nonché la sua attività immunostimolante sono i fattori chiave da ottimizzare per una specifica applicazione terapeutica.
La traduzione e la stabilità aumentate possono essere influenzate da molte regioni di RNA. 5 ′ mRNA e 3 ′ UTR sono responsabili del reclutamento di proteine e microRNA leganti l'RNA e possono influenzare profondamente l'attività traslazionale.
L'alterazione dei codoni rari nelle sequenze di codifica delle proteine con codoni sinonimi frequenti, una cosiddetta ottimizzazione dei codoni, può provocare cambiamenti dell'ordine di grandezza nei livelli di espressione.
La modifica del cappuccio 5 'mRNA può anche migliorare la traduzione dell'mRNA inibendo il decadimento dell'RNA e migliorando la resistenza alla degradazione enzimatica.
La modifica chimica delle basi dell'RNA può essere impiegata per modificare l'attività immunostimolante dell'RNA. 8 , 9 L'entità dell'immunostimolazione può dipendere dall'applicazione e in alcuni casi può effettivamente migliorare le prestazioni, come nel caso dei vaccini.
Infine, i metodi e i veicoli della somministrazione intracellulare rimangono il principale ostacolo all'applicazione generale dei trattamenti con mRNA. Con poche eccezioni, il rilascio intracellulare di mRNA è generalmente più difficile di quello di piccoli oligonucleotidi e richiede l'incapsulamento in una nanoparticella di rilascio, in parte a causa delle dimensioni significativamente maggiori delle molecole di mRNA (300 -5000 kDa, ∼ 1-15 kb) rispetto ad altri tipi di RNA (piccoli RNA interferenti [SIRNA], ∼ 14 kDa; oligonucleotidi antisenso [ASO], 4-10 kDa).
In questo studio, discutiamo le sfide per la traduzione clinica di terapie basate su mRNA, con particolare attenzione ai recenti progressi nei biomateriali e nelle strategie di consegna, e presentiamo una panoramica delle applicazioni della consegna basata su mRNA . su mRNA per terapia proteica, editing genico e vaccinazione .
È di fatto notare che da più di 30 anni esiste l '" RNA messaggero " ... questa tecnologia non ha trovato un'applicazione "di massa " (poche applicazioni altamente mirate contro il cancro) e che Covid-19 in 6 mese è diventato "l'app mRNA del secolo ".
D'altra parte, " questi 30 anni di ricerca in sordina ", si spera, avranno consentito un controllo tecnico sicuro della manipolazione dell'mRNA.
È anche importante ricordare che migliaia di campioni di " RNA viral vector " sono circolati tra i laboratori per più di 20 anni e che secondo la loro classificazione (pericolosi) 2 o 3 coronavirus (e HIV) non richiedono laboratori di livello 2 o 3 (BL2, BL3) e non di livello 4 (P4, il livello più alto, l'OMS ha circa 50 P4 ufficialmente identificati).
Ciò continua nel 2020 , quando uno scienziato canadese ha inviato virus mortali a Wuhan.
Una sequenza unica per SARS-Cov2: "furin"
Si segnala inoltre che Sars-Cov2 contiene, oltre ad eventuali sequenze di HIV, una speciale sequenza legata alla proteina “furin” che favorisce il clivaggio della proteina S di Sars-Cov2 e che questa è stata brevettata dal 2007, a nome di Reasearch Foundation , a sua volta allo stesso indirizzo di un'altra fondazione, la Clayton Foundation, a quanto pare collegata alla società americana Clayton Biotechnologies
In altre parole, nessuno sa veramente chi sia il proprietario di questo brevetto del 2007 tranne che si afferma:
"Il governo degli Stati Uniti può possedere alcuni diritti su questa invenzione in virtù della concessione del numero AI 42775 dal National Institutes of Health "
Questa sequenza “ furin ” in Sars-cov2 è interessante perché non esisteva in Sars-Cov1 e già nel 2006 un team aveva quindi introdotto la sequenza “ furin ” in Sars-cov1 per vedere il risultato sul décolleté.
" La scissione della furina del picco della glicoproteina del coronavirus SARS migliora la fusione cellula-cellula, ma non influisce sull'ingresso del virione" Kathryn E. Follis, Joanne York, Jack H. Nunberg ⁎ Montana Biotechnology Center, Ricevuto 16 Dicembre 2005; Online 7 marzo 2006.
“In questo rapporto , abbiamo esaminato l'effetto della scissione proteolitica sulla capacità della glicoproteina S SARS-CoV di mediare la fusione cellula-cellula e l'infettività virale. Mostriamo che l'introduzione di un motivo di riconoscimento della furina prototipo in R667 consente la scissione efficiente della glicoproteina mutante e un aumento dell'attività di fusione cellula-cellula. "
È un fatto pubblico: l' introduzione della sequenza furinica in un coronavirus di tipo SARS è stata brevettata e prodotta in laboratorio.
Inoltre, le squadre cinesi molto rapidamente nel 2020 "riscopriranno " la sequenza " furin " in SARS-Cov2 che non esisteva in SARS-Cov1.
Infine, ricordiamoci che sequenze di RNA molto brevi sono molto efficienti e il CNRS lo ha detto nel 2018:
“ È noto che i piccoli RNA svolgono un importante ruolo regolatore in un'ampia gamma di organismi in molti processi biologici, tra cui lo sviluppo dell'embrione, la differenziazione cellulare, la crescita / proliferazione e l'apoptosi / morte cellulare . Gli RNA regolatori eucariotici generalmente variano in dimensioni da ~ 20 a 30 nt e le tre classi principali sono microRNA (miRNA), piccoli RNA interferenti (siRNA) e RNA che interagiscono con piwi-RNA (piRNA). Profili di espressione di miRNA alterati sono stati trovati in una serie di malattie , sottolineando l'importanza dei MIARN in biologia e la necessità di continuare lo sviluppo di strumenti di ricerca per lo studio dell'RNA in generale . "
Il CNRS esprime qui i risultati reali dell'mRNA:
- una sequenza molto breve può avere un ruolo molto (troppo) importante,
- in teoria ogni breve sequenza di mRNA ha una singola funzione e si verifica in una singola fase molto mirata ,
- in pratica, la stessa sequenza può avere un ruolo primario ben identificato (legame) e un effetto collaterale più sconosciuto) ad esempio sulla trascrizione,
- qualsiasi errore o ricombinazione su una breve sequenza (o una ricombinazione con una sequenza di un secondo virione presente nella sequenza "ingegnerizzata") può ovviamente avere un effetto deleterio significativo.
Qui troviamo l'adagio "non è il virus che causa la malattia ma l'ambiente ".
Qui, gli autori riconoscono che attori come BioNtech e Moderna sanno tecnicamente ed eticamente come selezionare e produrre un mRNA iniettato “ sicuro ” , ma c'è legittimamente l'ignoto “ cosa ne sarà di quest'ultimo quando incontra “ ambienti (commorbidità) nelle cellule umane ”. , cellule, residui di altri diversi RNA virali? "
Cina, Usa e gli altri: insieme sui " coronavirus chimerici "
Dovrebbe essere chiaro che l'HIV è il virus pandemico più studiato e più antico. L'HIV è quindi diventato rapidamente il vettore virale per la ricerca. E a volte a un livello "sorprendente " come per i virus usati in laboratorio
Abbiamo sviluppato materiali di riferimento sicuri e stabili per l'RNA del virus Ebola incapsulando l'RNA virale "antisenso" in particelle sotto forma di HIV-1. Le particelle lentivirali sono carenti di replicazione e non infettive a causa della mancanza di geni HIV-1 e proteine Envelope. I geni del virus Ebola sono stati subclonati per il confezionamento in due preparati lentivirali, uno contenente NP-VP35-GP e l'altro VP40 e L RNA. Ogni materiale di riferimento è stato formulato come standard di alto livello da utilizzare come standard per standard secondari o interni e una preparazione di titolo inferiore di 10.000 volte per fungere da controllo sotto test. I preparati sono stati liofilizzati per massimizzare la stabilità.
Questi materiali di riferimento dell'RNA del virus HIV-Ebola erano adatti per l'uso con test rt-PCR quantitativi interni e commerciali e con rt-PCR digitale. I materiali di riferimento per HIV-Ebola rnr sono stabili fino a 37 ° C per due settimane, consentendo la spedizione del materiale in tutto il mondo a temperatura ambiente. Questi risultati supportano un'ulteriore valutazione del materiale di riferimento dell'HIV-Ebola RNA in uno studio collaborativo internazionale volto alla creazione del 1 ° standard internazionale per l'RNA di Ebola.
Generazione di particelle lentivirali contenenti RNA del virus Ebola. A) Geni del virus Ebola nucleoproteina (NP, rosso scuro), proteina virale 35 (VP35, rosso), glicoproteina (GP, arancione), proteina virale 40 (VP40, verde chiaro) e gene codificante per la polimerasi L (verde scuro) ) sono stati clonati sequenzialmente nel vettore lentivirale pSF_lenti tra i siti di restrizione SalI e BstEII. Vengono mostrati gli elementi principali del vettore lentivirale utilizzato per la produzione di RNA virale e l'incorporazione nella particella di HIV.
Si noti inoltre che uno studio ha dimostrato che Sars-cov2 ed Ebola condividono lo stesso sito chiave della sequenza non strutturale Nsp12 nel dominio.
“ La polimerizzazione dell'RNA SARS-CoV-2 si basa sulla polimerasi principale, Nsp12, indicata anche come RNA polimerasi rn-dipendente , RdRp. Nsp12 è un grande enzima (932 residui) caratterizzato da due domini conservati: NiRAN e domini della polimerasi.
“ Sebbene l'identità di sequenza di Nsp12 con virus Ebola rdrp (EBOV) sia piuttosto scarsa (16%), l'analisi strutturale indica la conservazione del sito della polimerasi attiva . "
Ricordiamo la funzione di questo sito: il polimero rn (abbreviato RNA o RNApol, e ufficialmente il polimero rn diretto dal DNA), è un enzima che sintetizza l' RNA da un modello di DNA . Utilizzando l'enzima elicasi, RNAP apre localmente il DNA a doppia elica in modo che un filamento dei nucleotidi esposti possa essere utilizzato come modello per la sintesi dell'RNA, un processo chiamato trascrizione .
Lo stesso articolo afferma inoltre che: “I residui catalitici possono essere identificati in SARS-CoV-2, previo allineamento con la polio rn polimerasi, i cui residui catalitici sono noti, con i due acidi aspartici Asp618 e Asp760. "
O "La polioviru s , gli agenti responsabili della poliomielite , appartengono al genere Enterovirus . A seguito di numerosi studi, in particolare negli anni '50, il poliovirus umano è diventato un modello di elezione per lo studio della biologia molecolare dei virus a RNA animale 1 , 2 "
Il risultato della "manipolazione " dell'HIV (non trattato) e dell'Ebola è che colpiamo 2 virus con un tasso di mortalità molto alto (> 50%). Aggiungi Malaria (posizione 17 su X (contagiosità) e 0,1% su Y (mortalità), possibilmente Poliovirus e "lentovirus ingegnerizzato " diventano una potenziale " bomba della salute " in caso di un effetto imprevisto.
In altre parole, in Sars-cov2 troviamo, sembra, una sequenza unica per la scissione con furina (in attesa di brevetto), la sequenza HIV gp41 per il legame, la sequenza HIV gp120 per la fusione di membrana e Sequenza di chiavi Ebola Nsp12 per la trascrizione e residui del virus del poliovirus.
Sars-Cov2, visto da questo punto di vista fattuale, è un “laboratorio in sé . "
Ovviamente gli Stati Uniti sono stati ed sono un importante attore tecnologico nella mutazione genetica. Hanno diversi laboratori di livello P4 e quasi 1.500 laboratori di livello P3. Ricordiamo che i coronavirus e l'HIV sono virus classificati di livello 3. Questo periodo corrisponde anche a dove la Cina ha raggiunto un livello elevato su queste tecnologie genetiche, in particolare a livello civile sulle malattie infettive virali, epidemie ricorrenti in Cina.
Quindi non è sorprendente che nel 2015 l'ormai famoso “ mazza da donna ” carta Dr Zheng-Li Shi , che è a capo dei centri di Wuhan (un livello BL3, un P4 livello previsto dalla Francia) e chi è la persona avendo scoperto nel 2013 il ceppo detto RaGT13 all'origine di Sars-Cov2, è stato scritto in collaborazione con l'americano Dr Ralf Baric.
Dal 2006, China-Wuham ha anche padroneggiato , qui con un team australiano , la manipolazione genetica dell'RNA.
“La sindrome respiratoria acuta grave (SARS) è causata dal coronavirus associato alla SARS (SARS-CoV), che utilizza l'enzima 2 (ACE2) che converte l'angiotensina come recettore per l'ingresso nelle cellule. Un gruppo di SARS (SL-CoV) è stato identificato nei pipistrelli a ferro di cavallo. SL-COV e SARS-CoV condividono organizzazioni genomiche identiche e identità ad alta sequenza, con la principale eccezione dell'estremità N della proteina spike (S), nota per essere responsabile del legame del recettore nelle CV. In questo studio, abbiamo studiato l'uso dei recettori SL-CoVS combinando un sistema di pseudovirus basato sul virus dell'immunodeficienza umana con linee cellulari che esprimono molecole ACE2 umane da pipistrello e zibetto o ferro. cavallo. Oltre al full-length S SL-CoV e SARS-CoV, una serie di S chimerici sono stati costruiti inserendo diverse sequenze di SARS-CoV S nello scheletro SL-CoV S . Diverse importanti osservazioni sono state fatte da questo studio. In primo luogo, SL-CoV S non poteva utilizzare nessuna delle tre molecole ACE2 come recettore. In secondo luogo, SARS-CoV S non è entrato nelle cellule che esprimono ACE2 del pipistrello. In terzo luogo, la chimera S che attraversa il dominio di legame del recettore precedentemente definito ha acquisito la sua capacità di entrare nelle cellule tramite ACE2 umano, ma con efficienze diverse per diversi costrutti. Quarto, una regione di inserzione minima (aminoacidi da 310 a 518)è trovato sufficiente per convertire SL-CoV S non legante ACE2 in legame ACE2 umano, indicando che SL-CoV S è ampiamente compatibile con la proteina SARS-CoV S sia nella struttura che nella funzione. "
Tutto è stato detto e fatto dal 2007: l'inserimento di brevi sequenze di mRNA modifica la trasmissione del (corona) virus “ tra specie ” , esperimenti condotti da più team in diversi paesi. Nulla impedisce (se non di provare) che l'evoluzione per ricombinazione o mutazione naturale consente l'evoluzione di Sars-bat in Sars-Cov2, ma questo articolo dimostra che un semplice inserimento di una sequenza in laboratorio permette immediatamente al virus "pipistrello" della Sars di passare agli esseri umani.
La cosa più interessante è che nel 2019 la dott.ssa Zheng-Li Shi , che nel frattempo è diventata la signora "donna pipistrello" ed esperta di Sars, è stata finanziata e ha lavorato anche per l' NIH americano
Anche la Svizzera, centro di eccellenza in medicina, era in gioco dal 2005. Il titolo di questo articolo riassume da solo l'intera questione dell'origine della SARS-Cov2:
“I vettori basati sul coronavirus sono un sistema promettente per fornire geneticamente più geni eterologici a cellule bersaglio specifiche. In primo luogo, i coronavirus sono virus a RNA a filamento positivo che si replicano nel citoplasma senza un intermediario del DNA, rendendo improbabile l' inserimento di sequenze virali nel genoma delle cellule ospiti. In secondo luogo, i coronavirus hanno il più grande genoma di RNA finora conosciuto e si prevede una capacità di clonazione di oltre 6 kb. In terzo luogo, i coronavirus mostrano un processo di trascrizione unico che si traduce nella sintesi di 6-8 RNA subeconomici, che codificano principalmente geni strutturali che possono essere sostituiti da più geni di interesse. In quarto luogo, il recettore HCoV 229E del coronavirus umano è espresso sulla cellula dendritica . In quinto luogo, la via naturale dell'infezione con il coronavirus è attraverso la mucosa.
L'obiettivo a lungo termine del nostro studio è quello di generare un nuovo vettore di vaccino contro l'HIV che (i) bersaglia e attiva la DC (ii) mostra una capacità di clonazione sufficiente per l'inserimento di diversi antigeni dell'HIV e citochine immunostimolatorie . , (iii) codifica per determinanti antigenici che inducono risposte anticorpali ampiamente neutralizzanti e (iv) può essere applicato attraverso le superfici mucose . "
Pertanto, l'utilizzo di un coronavirus come vettore integrando in esso inserti di altri virus presenta molti vantaggi. È vero, USA, Cina, Svizzera e molti altri nel 2005/2006 stavano lavorando agli inserimenti di RNA sui coronavirus come vettore virale e l'HIV era il " problema comune ". Infatti, dall'inizio degli anni 2000, le manipolazioni effettuate sugli adenovirus (quindi il DNA) sono state "reimpostate" sui virus a RNA ed i coronavirus sono diventati lo "standard".
“I coronavirus sono virus a RNA a filamento positivo, con involucro, considerati vettori promettenti per lo sviluppo di vaccini perché (i) i geni possono essere eliminati, con conseguente attenuazione dei virus; (ii) il loro tropismo può essere modificato manipolando la loro proteina spike; e (iii) i geni eterologhi possono essere espressi semplicemente inserendoli semplicemente con appropriati segnali di trascrizione coronavirale nel genoma "
Questi mRNA subgenomici sono prodotti in quantità costanti ma non sufficienti e, in generale, ciascuno viene tradotto per produrre una singola proteina. Per sfruttare queste caratteristiche, abbiamo sviluppato un vettore di espressione multigenico basato sul coronavirus umano 229E . Abbiamo costruito un prototipo di vettore di RNA contenente le estremità 5 'e 3' del genoma del coronavirus umano, l'intero gene di replicazione del coronavirus umano e tre geni reporter.
E l'Unione Europea nel 2006 si è concentrata su questo tecnologo dell'HIV.
In altre parole, "l'inserimento di sequenze di HIV-1 nei coronavirus era uno standard in molti laboratori dal 2005 al 2010. "
Ancora più interessante è lo sponsor dello studio svizzero Coronavirus-HIV nel 2007 sopra
Lo studio è stato finanziato dall'americano NIH (J. Bradac), ora guidato dal dottor Antony FAUCI
Altri paesi stanno facendo esattamente le stesse esperienze. Questo esempio polacco conferma che il brevetto del 2004 dell'Institut Pasteur, preso da solo, non può costituire alcuna prova dell '"origine di laboratorio" della SARS-cov2 da parte dell'Institut Pasteur:
Inoltre, un articolo russo del 2013 osservava: "Nonostante il fatto che i lentivirus come il virus dell'anemia infettiva equina, il virus dell'immunodeficienza felina e il virus dell'immunodeficienza bovina siano usati come modelli per i vettori lentivirali, il virus dell'immunodeficienza umana di tipo 1 (HIV-1) rimane il più comunemente usato per produrre il vettore del virus. Ciò è associato al fatto che il ciclo di vita di questo virus è meglio compreso di quello di altri virus ".
Sars-cov1: una "storia" in sé quanto alla sua origine.
Un articolo identifica alcuni dettagli iniziali che pongono domande:
In realtà si sono verificati 3 episodi epidemici di SARS: uno nel 2002/2003, uno nel 2004 e uno nel 2005.
"Il SARS Coronavirus (SARS-CoV) è l'agente eziologico della sindrome respiratoria acuta grave (SARS), una sindrome polmonare acuta che, quando è comparsa nell'HIV 2002-2003 (TOR), ha causato la morte circa 800 persone, o quasi il 10% di quelle infette (Drosten, 2003; Fouchier, 2003; Ksiazek, 2003; Kuiken, 2003). Nonostante il fatto che SARS-CoV sarebbe riapparso, l' ultimo HIV- 2003-2004 (DDG), solo una manciata di persone sono state trovate infettate dal virus. Queste persone sembravano avere sintomi molto meno gravi e non è stata osservata alcuna trasmissione secondaria (Liang, 2004; Peiris, 2004; Song al, 2005).
Nel 2004 sono stati segnalati anche casi gravi di SARS, ma questi erano il risultato di infezioni di laboratorio (Normile, 2004).
Questo articolo ha già il merito di confermare che " incidenti " si sono effettivamente verificati in laboratorio . Più sorprendentemente, sembra indicare che mentre la SARS umana può contaminare lo zibetto, non è vero il contrario.
“La Figura 5A mostra che i domini S1 delle tre proteine S legano in modo efficiente ACE2 di civetta delle palme (numero di accesso AY881174), mentre solo il dominio S1 di TOR2 lega efficacemente l'ACE2 umano. Va notato che il dominio S1 del virus isolato durante l'epidemia del 2003-2004 lega l'ACE2 dello zibetto ACE2 molto più efficacemente di quanto leghi l'ACE2 umano ”.
Sembrerebbe che la versione ufficiale ( poiché i geni della sequenza dello zibetto sono vicini a quelli della SARS-cov1 umana che lo zibetto sarebbe "paziente 0 " di Sars-1) sarebbe un puro sillogismo. Scientificamente sarebbe secondo questo studio piuttosto " l'uomo che sarebbe il paziente 0 dello zibetto "
Ed è esattamente quello che dice Alina Chan nel suo studio per Sras-cov2
"I genomi SARS-CoV-2 sui campioni di mercato provenivano molto probabilmente da esseri umani infettati da SARS-CoV-2 che erano fornitori o visitatori del mercato"
Zibetto e pangolino hanno quindi la stessa sorte.
E, una strana coincidenza non annotata, anche il dottor Zheng-Shi Li implica implicitamente in un articolo congiunto con l'Australia nel 2008:
“In questo studio, abbiamo studiato l'uso dei recettori SL-CoVS combinando un sistema di pseudovirus basato sul virus dell'immunodeficienza umana con linee cellulari che esprimono ACE2, pipistrello, zibetto umano .
Oltre alla S completa di SL-CoV e SARS-CoV, una serie di chimere S è stata costruita inserendo diverse sequenze di SARS-CoV S nella spina dorsale di SL-CoV S. Diverse importanti osservazioni sono state fatte a da questo studio. In primo luogo, SL-CoV S non può utilizzare nessuna delle tre molecole ACE2 come recettore. In secondo luogo, SARS-CoV S non è entrato nelle cellule che esprimono ACE2 dei pipistrelli. In terzo luogo, la S chimerica che attraversa il dominio di legame del recettore precedentemente definito ha acquisito la sua capacità di entrare nelle cellule tramite ACE2 umano, ma con efficienze diverse per diversi costrutti. In quarto luogo, una regione di inserzione minima (aminoacidi da 310 a 518) è stata trovata sufficiente per convertire SL-CoV S non legante ACE2 in legame ACE2 umano Viene discussa l'importanza di questi risultati rispetto all'origine del virus, alla ricombinazione del virus e al cambiamento dell'ospite ”.
Il dottor Zheng-Shi Li conferma che il pipistrello e il coronavirus umano non “ trasmettono in modo incrociato” ma fa attenzione a non concludere sulla versione “ ufficiale ” , ovvero che la Sars-Cov1 umana è stata trasmessa dallo zibetto.
Difficile per il dottor Zheng-Shi Li nel 2007 dire il contrario del serio studio del 2005 sopra menzionato. Lei " esce " con quello che sembra essere un eufemismo: "Esiste una sequenza genomica molto alta (oltre il 99%) tra il virus della SARS negli zibetti e la SARS-CoV negli esseri umani, il che supporta l'idea che SARS-CoV è di origine animale. Tuttavia, studi successivi hanno dimostrato che le civette delle palme nelle fattorie e sul campo erano in gran parte esenti da infezione da SARS-CoV.
E in una frase premonitrice: "Questi risultati suggeriscono che, sebbene sia improbabile che gli SL-CoV scoperti nei pipistrelli fino ad ora infettino gli esseri umani utilizzando ACE2 come recettore, resta da vedere se sono in grado di infettare gli esseri umani. utilizzare altre molecole di superficie di certi tipi di cellule umane per entrare. È anche ipotizzabile che questi virus diventino infettivi per l'uomo se subiscono una variazione di sequenza n-terminale ”.
La cosa più sorprendente, dopo aver scritto l'articolo del 2008 che Sars-Cov1 non poteva provenire dai pipistrelli e che la versione ufficiale del mondo era stata originata dallo zibetto, il dottor Zheng-Shi Li avrebbe poi affermato con una certa aplomb (min 8,47 da il video qui sotto) che " i pipistrelli che abbiamo trovato in profondità in una grotta perduta nel 2011 hanno confermato che Sars-Cov1 proveniva effettivamente da pipistrelli ".
https://www.youtube.com/watch?v=2uDpARUBPEE&feature=youtu.be
La verità sull'origine della SARS-Cov1, a causa della sua bassa diffusione e della bassa mortalità assoluta, ha fatto sì che nessuno mettesse in dubbio la versione ufficiale e le successive incongruenze e contraddizioni.
Dal lentivirus al possibile problema
La sezione precedente mostra, su obiettivi legittimi, durata e numero di attori , l'uso estensivo di RNA dei lentivirus , in particolare basato sull'HIV nei laboratori BL2 e BL3 e il tipo di coronavirus SARS.
E 'quindi legittimo almeno “ mettere sul tavolo ” l'opzione scientifica che Sars-cov2, direttamente (campione che viene persa) o indirettamente (inoculazione di una cavia) “avrebbe probabilmente avere come paziente zero a lentivirus di laboratorio ”, e questo con una probabilità statistica almeno pari, per non dire ad un ordine di grandezza maggiore di un'origine naturale di Sars-cov2 per ricombinazioni e mutazioni successive.
Inoltre, sono noti i potenziali problemi dell'utilizzo di mRNA corto del coronavirus
“La ricombinazione avviene ad un alto tasso di replicazione retrovirale e la sua osservazione richiede un virione contenente due diverse molecole di RNA (particelle eterodimeriche). L'analisi dei ricombinanti retrovirali formati dopo una singola serie di repliche ha rivelato che (i) i marker non selezionati cambiavano più frequentemente del previsto rispetto alla velocità di ricombinazione del marker selezionato ”.
Più semplicemente, una manipolazione che non introduce sequenze esemplificative 2 provenienti da 2 virus diversi, anche se si suppone che queste sequenze introdotte siano inattive, in certi casi, per determinate azioni sulla cellula umana, potrebbe dare rapidamente ricombinazioni ed effetti incontrollati. Un effetto deleterio della ricombinazione casuale può anche verificarsi con i cosiddetti inserti di RNA interferenti
La tecnologia nel 2020 ovviamente ha compiuto notevoli progressi per limitare questi possibili effetti “ avversi e casuali ”, ma anche nel 2015 (Germania) e nel 2018 (USA) questo è visto come un problema da considerare.
“ Una delle preoccupazioni che ne derivano è l'interruzione involontaria dell'espressione genica da parte di shRNA sensoriali o filamenti antisenso (escluso il targeting). Riportiamo qui, una nuova soluzione che neutralizza specificamente l'attività sfavorevole dei filamenti di senso di shRNA dal loro sequestro da parte di RNA hard decoy (TuD). Uso del virus dell'epatite C come esempio clinicamente rilevante ... "
“La ricombinazione può derivare dall'attività di scambio di pattern della trascrittasi inversa lentivirale12. Poiché il capside del lentivirus normalmente racchiude un dimero dei genomi dell'RNA, la ricombinazione intermolecolare potrebbe in linea di principio avvenire nelle cellule bersaglio infettate con un singolo virione ”.
L'esito della ricombinazione “ off target ” e indesiderata, anche se statisticamente basso, nella cellula umana, menzionato nell'articolo precedente, rimane valido a priori per qualsiasi vaccino a RNA messaggero.
SARS-Cov e HIV, una lunga storia
I nostri concittadini potrebbero essere sorpresi di scoprire questo studio del 2003 (subito dopo SARS1) di Pasteur Hong-KONG che confronta le sequenze di HIV (gp41) presenti nella SARS Cov1
Inoltre, i ricercatori americani del 2007 isolano e inseriscono, quindi in direzione opposta, lo Spike di Sars-1 su un vettore basato sull'HIV.
Quindi a quel tempo abbiamo utilizzato un vettore HIV, modificato dalle sequenze Sars per sviluppare con precisione soluzioni per il trattamento di altri tipi di gravi malattie polmonari ( https://www.liebertpub.com/doi/10.1089/hum.2006.194 )
“ Il coronavirus della sindrome respiratoria acuta grave umana (SARS-CoV) è un virus altamente infettivo che causa gravi infezioni respiratorie negli esseri umani. L'involucro spike della glicoproteina SARS-CoV , il principale determinante del tropismo SARS-CoV, è stato isolato e utilizzato per pseudotipizzare un vettore basato sul virus dell'immunodeficienza umana (HIV).
Il vettore pseudotipato di HIV a spillo è stato generato e valutato in vitro su cellule epiteliali delle vie aeree umane ben differenziate e su espianti bronchiali e in vivo nel tratto respiratorio murino. L'involucro a spillo è stato meno efficace nel promuovere la trasduzione del vettore dell'HIV dell'epitelio delle vie aeree murine rispetto a un mutante di delezione ottimizzato dell'involucro del virus ebola, glicoproteina (NTD6L), che è stato utilizzato come riferimento . Tuttavia, il vettore pseudotipato dell'HIV era significativamente più efficiente del vettore pseudotipato NTD6L sull'epitelio delle vie aeree umane, come dimostrato dal trasferimento genico dalacZ in colture primarie di cellule epiteliali e espianti bronchiali. Inoltre, questo studio mostra che il vettore pseudotipato basato sull'HIV può tradurre in modo efficiente le cellule dendritiche umane e le cellule epiteliali esofagee, il che può avere implicazioni nello studio dei meccanismi di patogenesi della SARS-CoV.
Un vettore HIV pseudotipato è un nuovo veicolo di trasferimento genico guidato dai polmoni che mostra risultati promettenti per il trattamento di malattie polmonari genetiche come la fibrosi cistica o il deficit di α 1 -antitripsina .
Se lo studio svizzero finanziato dal NIH nel 2006 " re già vincolato " HIV e coronavirus era nella " direzione opposta ", ovvero era stata inserita una sequenza di un coronavirus in un vettore a base di HIV. Poi, principalmente in Cina, sono comparsi gli studi che confrontavano; analogie e differenze; SARS umana per battere la SARS e quindi l'inizio degli inserti di laboratorio nella sequenza della SARS.
Come promemoria, lo studio di cui sopra del 2007, congiunto tra scienziati cinesi e australiani, perché nel 2007 non abbiamo capito come i pipistrelli della SARS potessero essere passati all'uomo. Questo studio descrive come l'inserimento di una breve sequenza di SARS umana nel pipistrello SARS permetta a quest'ultimo di passare agli umani, cosa che non può fare da solo , ed è co-firmato dal dottor Zheng -Li Shi , la "donna pipistrello" che scriverà il famoso articolo del 2015 con il dottor Ralph Baric dagli Stati Uniti .
Come in precedenza, se possiamo accettare una possibile mutazione di Sars-pipistrello (o altro) che si sarebbe "trasformato" in Sars-umano, questo esperimento Australo-Cinese del 2007 prova certamente che un semplice inserimento genetico nella Sars -CS permette che venga immediatamente trasmissibile all'uomo (Sars-Cov1).
Tuttavia, dall'inizio della pandemia COVID19, a marzo 2020 è apparso un articolo indiano che presentava la presenza di 4 inserti nuclidici corrispondenti a sequenze del virus HIV presente in SARS-Cov2. Questo studio è stato ritirato sotto pressione, ci è stato detto.
Questo studio sulla sequenza (allegato) dell'HIV gp120 completa solo su SARS-Cov2 ciò che Pasteur Hong-Kong ha identificato su SARS-Cov1 nel 2004, ovvero la sequenza dell'HIV gp41 (fusione di membrana), le due sequenze che si raggruppano insieme in una sequenza nota chiamata HIV gp160.
In altre parole " in poche mutazioni e ricombinazioni e 20 anni " la SARS avrebbe " acquisito " nelle posizioni giuste " la sequenza di hooking dell'HIV ", " la sequenza di fusione della membrana dell'HIV ", la " sequenza di scissione della furina " o anche il " sito attivo. Ebola key polimerasi Nsp12 ”.
Il primo punto da notare in questa tabella dello studio indiano sopra è stato che le 4 sequenze di HIV in questione provenivano da 4 località geografiche diverse e distanti. Il secondo punto sorprendente è stato che nei 2 inserti più lunghi una parte è stata " cancellata " sapendo che questo migliora la positività dell'inserto e lo rende più stabile (più corto è l'inserto, più è stabile).
I lettori troveranno di seguito un riassunto molto completo delle argomentazioni delle 2 parti , per l'opzione evoluzione naturale e per l'opzione “ contatore infortuni di laboratorio ”.
Avvisi cinesi
È importante essere consapevoli che sono stati i media statunitensi e cinesi a menzionare molto presto le analogie tra HIV e SARS e la presenza di ceppi prima di quella di Wuhan.
“ Altri virus altamente contagiosi, tra cui l'HIV e l'ebola, prendono di mira un enzima chiamato furina, che agisce come attivatore di proteine nel corpo umano. Molte proteine sono inattive o dormienti quando vengono prodotte e devono essere "tagliate" in momenti specifici per attivare le loro varie funzioni.
Esaminando la sequenza genomica del nuovo coronavirus, il professor Ruan Jishou e il suo team dell'Università Nankai di Tianjin hanno trovato una sezione di geni mutati che non esistevano nella SARS, ma erano simili a quelli trovati nell'HIV e ebola '
“ Questo virus può utilizzare i meccanismi di confezionamento di altri virus come l'HIV. "
La mutazione, che il team di Ruan ha descritto come un " inserimento inaspettato ".
In uno studio di follow-up, un gruppo di ricerca guidato dal professor Li Hua dell'Università di scienza e tecnologia di Huazhong a Wuhan, nella provincia di Hubei, ha confermato i risultati di Ruan.
"La mutazione non è stato trovato in Sars mari o il Bat-CoVRaTG13 un coronavirus pipistrello che è stata considerata come la fonte originale di nuovo coronavirus, con il 96 per cento somiglianza nei geni, ha Egli ha detto. "
“ All'inizio, il virus non era considerato una delle principali minacce, con i centri cinesi per il controllo e la prevenzione delle malattie che affermavano che non c'erano prove di trasmissione da uomo a uomo. "
Per quanto ricorda il Dr. David Relman (Magna Cum Laude Harvard, Professore a Stanford) " non conosciamo ancora l'origine della SARS-COV2".
" SARS-CoV-2 è un beta coronavirus i cui parenti apparenti più prossimi, RaTG13 e RmYN02, sarebbero stati raccolti da pipistrelli rispettivamente nel 2013 e nel 2019, nella provincia dello Yunnan, in Cina ( 1 ). Il Covid-19 è stato segnalato per la prima volta nel dicembre 2019 a oltre 1.000 miglia di distanza nella città di Wuhan, nella provincia di Hubei, in Cina. Al di là di questi fatti, la "storia dell'origine" manca di molti dettagli chiave, tra cui una storia evolutiva recente del virus plausibile e adeguatamente dettagliata, l'identità e la provenienza dei suoi antenati più recenti e sorprendentemente , luogo, tempo e meccanismo di trasmissione della prima infezione umana ”.
Allo stesso modo, nel febbraio 2020, quelli sono specialisti cinesi che affermano che SARS-Cov2 non proviene dal mercato di Wuhan .
"Il coronavirus sindrome respiratoria acuta grave 2 (SARS-CoV-2) è invece stato importato da altrove, ha detto che i ricercatori del Giardino Botanico Xishuangbanna Tropical, dal l'Accademia Cinese delle Scienze e del Research Institute cinese sul cervello. Il team, guidato dal Dr. Yu Wenbin, ha sequenziato i dati del genoma di 93 campioni di SARS-CoV-2 forniti da 12 paesi al fine di risalire all'origine dell'infezione e capire come si diffonde. Quello che hanno scoperto è che, sebbene il virus si fosse diffuso rapidamente al mercato all'ingrosso di pesce di Huanan a Wuhan, c'era ancheha avuto due significative "espansioni" della popolazione l'8 dicembre e il 6 gennaio "
Ed è la media in Cina hanno avanzato, vedere confermano che il 1 ° caso precedette il mercato a Wuhan.
Tanto più che le autorità cinesi hanno confermato che nessun animale nel mercato di Wuhan è risultato positivo.
“ I media di tutto il mondo hanno parlato della teoria del 'mercato fresco'. Eppure anche a gennaio era chiaro che le probabilità che il coronavirus si diffondesse per la prima volta sul mercato stavano diminuendo. Non ci sono prove che siano stati venduti pangolini vivi, un altro animale ritenuto portatore intermedio del bar coronavirus, ma almeno una bancarella potrebbe aver venduto zibetti. Nonostante i numerosi test su animali e parti di animali venduti sul mercato, nessuno è mai risultato positivo al virus , secondo il CDC in Cina. Gli unici campioni positivi erano "ambientali" e potrebbero provenire da acque reflue "
E queste stesse autorità riconoscono anche che i campioni " di laboratori non autorizzati " sono stati distrutti.
Ancora più credibile il “ eroe cinese di Sars-Cov1 ”, l'esperto Zhong Nanshan si confuta l'origine di Sars-Cov2 al mercato di Wuhan dicembre 2019 .
"Le prove disponibili suggeriscono che i pipistrelli erano l'ospite serbatoio per il nuovo coronavirus che potrebbe quindi essere passato attraverso un ospite intermedio animale per l'uomo. Inizialmente si credeva che il mercato all'ingrosso di frutti di mare Huanan di Wuhan, dove venivano scambiati animali selvatici e che era collegato a 27 dei primi 41 casi, fosse la fonte dell'infezione.
Tuttavia, gli epidemiologi avevano trovato tracce del virus solo in campioni prelevati dal mercato. Inoltre, Zhong detto, il primo caso noto di coronavirus a Wuhan , e la maggior parte dei casi 1.099 a livello nazionale con collegamenti Wuhan che sono stati studiati nel mese di gennaio, ha avuto alcun rapporto con il mercato a tutto " .
" Dobbiamo sapere esattamente come è stato trasmesso il virus", ha detto. “È un processo evolutivo che può avvenire ovunque. I dati hanno mostrato che questo era accaduto in Cina, Francia e Stati Uniti. Abbiamo davvero bisogno di sapere come è successo.
“Zhong ha detto che ora è stabilito che i primi casi sono arrivati a settembre e novembre. "Hanno preso forma a novembre negli Stati Uniti e anche in Francia e in Italia , quindi è un problema globale e il virus potrebbe essere esistito molto prima [è stato segnalato in Cina]".
L'implicazione sulla data e l'origine del virus " chiama fuori ".
Infine , citiamo l'allerta cinese dell'aprile 2020 di 10 ricercatori della Fudan University di Shanghai , tutti operanti in un laboratorio di livello BL3 e le cui competenze non possono essere messe in dubbio. Questo articolo è stato rapidamente e "stranamente " ritirato.
Tuttavia, viene ripetuto in una sezione seguente, poiché le analogie cliniche tra SARS 2 e HIV-1 sul sistema immunitario e sui linfociti T (come la MERS) nella fase grave sollevano possibili interrogativi.
Passaggio del vettore con inserto HIV all'HIV sequenziato in un vettore di tipo LENTIVIRUS
Abbiamo menzionato l'inserimento di brevi sequenze esterne in vettori basati sull'HIV. Abbiamo detto che, al contrario, Pasteur Hong-Kong su Sars-cov1 e Indians su Sars-cov2 trovano sequenze di HIV-1 gp41 e gp120. E quindi una domanda oggi è trovare il collegamento tra questi studi:
Abbiamo messo, e perché, un inserto HIV (e / o virus) in un lentivirus (coronavirus)?
A 1 st risposta esiste, ad esempio, le società BPS a San Diego offerte per $ 800 un lentovirus con l'HIV per la lotta contro l'inserto COVID19.
L'inserto HIV appare in alto a destra. L'azienda specifica inoltre che questo inserto HIV non è pericoloso, ma che richiede un laboratorio di livello BL2.
Si noti che il Presidente e CEO dell'unità di San Diego è uno scienziato cinese e il co-fondatore di BPS è anche uno scienziato cinese che vive e lavora a Shanghai . Sul loro sito è disponibile un video " una bomba a orologeria che ripercorre l'origine e la diffusione di sars-cov2 ". https://youtu.be/zBG9Dz4NIEU
Oggi il numero e lo spettro di applicazioni che combinano lentivirus e HIV è alto e ampio.
Lo studio che segue è interessante perché fa il collegamento sull'analogia clinica di HIV e SARS-cov2 su un tropismo che condividono, vale a dire il passaggio a uno stadio grave in cui il virus " aggira o inganna il sistema. immune ” in particolare la cosiddetta cellula CD4.
"Un potenziale approccio per controllare la replicazione dell'HIV-1 senza cART è quello di interferire con la capacità dell'HIV-1 di contrastare i fattori di restrizione innati dell'ospite"
Per sfruttare l'innata funzione antivirale del fattore di restrizione della citidina deami-naseAPOBEC3G (A3G), abbiamo sviluppato vettori lentivirali autoattivanti che forniscono in modo efficiente la cellula bersaglio Vif resistente a À3G-D128Kto "
Le cellule T CD4 + umane esprimono A3G, che, in assenza di Vif codificato viralmente, inibisce potentemente la replicazione dell'hiv-1. Il mutante A3G D128K (A3G-D128K) è resistente alla degradazione mediata da Vif da parte dell'HIV-1 e si prevede che la sua espressione nelle cellule T CD4 + umane determini una potente inibizione della replicazione e diffusione del tipo HIV-1 selvaggio. I vettori lentivirali sono uno dei veicoli più efficienti per il rilascio di geni terapeutici alle cellule T CD4 + umane. Tuttavia, l'erogazione di A3G-D128K utilizzando un vettore lentivirale tradizionale è inefficiente, poiché l'espressione di A3G-D128K nelle cellule produttrici di virus determina la sua incorporazione virionica , con conseguente perdita radicale diinfettività virionica e ipermutazione fatale del gene terapeutico. Per prevenire l'espressione di A3G-D128K nelle cellule che producono lentivettore, abbiamo costruito vettori lentivirali che codificano due frammenti sovrapposti di A3G-D128K (designati A3 e 3G; Fig-ure 1A). Una copia ripetuta in avanti di 900 bp sovrapposta viene efficacemente soppressa durante la trascrizione inversa da schemi di commutazione della trascrittasi inversa hiv-1 in ripetizioni omologhe, con conseguente ricostituzione funzionale di A3G-D128K.
"In questo rapporto, abbiamo testato la strategia di vaccino della DC nel modello umanizzato di osso-fegato-timo osseo (BLT) topi CD della capacità di ottenere una risposta delle cellule T che sopprime la replicazione di HIV-1 ".
Un punto chiave è che l'obiettivo di questi recenti " lentivirus " con inserto HIV è quello di aiutare le cellule T CD4 del paziente, in sostituzione del trattamento antivirale contro l'HIV.
In particolare per l'HIV, ci sono 2 tipi di stadi per “pazienti lievi” che possono convivere con il virus HIV, ma una piccola minoranza che entra nel tropismo T di grave infezione rapida che vede le cellule CD4 diminuire molto. velocemente. https://www.sciencedirect.com/topics/immunology-and-microbiology/tropism
"L' HIV tropico X4 di solito si verifica più tardi nell'infezione ed è associato a un rapido declino dei linfociti T CD4, apoptosi delle cellule CD8 e una risposta umoristica alterata, suggerendo un legame tra l'emergere del virus tropico x4, il deterioramento clinico e progressione verso l'AIDS "
Tuttavia, è esattamente la stessa sequenza di successione di questi 2 tropismi con Sars-Cov2 (rispettivamente HIV) con molti pazienti che rimangono " miti " prima, per cambio di tropismo, di avere COVID19 (rispettivamente AIDS) con una rapida caduta Cellule CD4-T.
Tuttavia, curiosamente, mentre l' idrossiclorochina aveva dimostrato molto presto un buon effetto antivirale contro l'HIV e quindi nel trofismo iniziale , uno studio successivo ha dimostrato che l'uso dell'idrossiclorochina su pazienti HIV senza trattamento antivirale , ha portato ad un'accelerazione nella riduzione del Cellule CD4-T .
"Nei pazienti con infezione da HIV che non assumevano terapia antivirale, l'uso di idrossiclorochina rispetto al placebo non ha ridotto l'attivazione delle cellule CD8, ma ha determinato una maggiore diminuzione del numero delle cellule CD4 e una maggiore replicazione virale ”.
La Francia non ignorava questo passaggio in fase grave e le citochine, il signor Levy, ex direttore dell'INSERM aveva pubblicato nel 2006 l'azione “anticitochine” contro l'HIV-1:
“Gli obiettivi teorici delle terapie con citochine nell'infezione da HIV sono avere un impatto sull'omeostasi dei linfociti T e / o migliorare le funzioni immunitarie o la mobilizzazione del reservoir dell'HIV. Tra le citochine, IL-2 e IL-7 sono agenti promettenti in fase di valutazione clinica. La somministrazione intermittente di IL-2 è di gran lunga la strategia più distante studiata nell'infezione da HIV. Questa citochina aumenta i linfociti T CD4 nelle personeinfetto da HIV. Recenti dati clinici hanno dimostrato che questo effetto si mantiene negli anni. La terapia IL-2 induce l'espansione periferica delle cellule T come risultato della sopravvivenza prolungata delle cellule T e della ridotta attivazione immunitaria. Questi effetti suggeriscono che la terapia con citochine può interferire con i fattori critici della malattia da HIV. Dati recenti mostrano che la terapia con IL-2 migliora la funzione immunitaria nei pazienti con infezione da HIV "
"Dio non gioca a dadi"
Cominciamo citando 2 fatti, uno quantitativo, l'altro qualitativo .
Il fatto quantitativo " Quello che era inaspettato è la sottorappresentazione delle persone che convivono con l' HIV (PLWH) tra i casi gravi di Covid-19. In una precedente serie di Wuhan, Cina, solo l'1,4% ha coinvolto PLWH.3 su 16.749 pazienti con COVID-19 ospedalizzati nel Regno Unito, l'1% ha coinvolto PLWH, ma l' HIV non ha avuto un impatto negativo sulla sopravvivenza .4 uno studio su 5.700 pazienti ricoverati in ospedale con COVID-19 nella zona di New York, un epicentro di non solo COV 2-infezione, ma da HIV così, ha trovato che solo il 0,8% coinvoltaHIV.8 Infine, in una serie più piccola da Barcellona, dei 62 dei 543 pazienti consecutivi con COVID-19 che hanno richiesto il ricovero ospedaliero, 5 erano PLWH: 3 uomini, 2 transgender, 4 dei quali in terapia efficace antiretrovirale (ART) .9 Nessuno è scaduto. "
Il dato qualitativo: sono stati i cinesi a menzionare abbastanza presto anche gli effetti clinici simili dell'HIV e del Sars-Cov2 ;
“ Il coronavirus che le cause covid-19 potrebbe uccidere le cellule immunitarie potenti che sono supposti per uccidere il virus, invece, gli scienziati hanno messo in guardia.
La scoperta di sorpresa , fatta da un team di ricercatori a Shanghai e New York , ha coinciso con l'osservazione dei medici di assistenza primaria che Covid-19 potrebbe attaccare il sistema immunitario umano e causare danni simili a quelli trovati nei i pazienti HIV .
Lu Lu, della Fudan University di Shanghai, e Jang Shibo, del New York Blood Center , si sono uniti al virus vivo, ufficialmente noto come Sars-CoV-2, in linee cellulari di linfociti T coltivati in laboratorio.
I linfociti T, noti anche come linfociti T, svolgono un ruolo centrale nell'identificazione e nell'eliminazione degli invasori alieni nel corpo "
Un medico che lavora in un ospedale pubblico che cura pazienti covid-19 a Pechino ha detto che la scoperta ha aggiunto ulteriori prove alla crescente preoccupazione negli ambienti medici che il coronavirus a volte potrebbe comportarsi come alcuni dei virus più comuni. noto che attaccano direttamente il sistema immunitario umano .
" Sempre più persone lo confrontano con l' HIV " , ha detto il medico che ha chiesto di non essere nominato per la delicatezza del problema "
“Questa osservazione è stata poi confermata dalle autopsie su più di 20 pazienti, il cui sistema immunitario è stato quasi completamente distrutto, secondo i media continentali.
I medici che hanno visto i corpi hanno affermato che il danno agli organi interni era simile a una combinazione di SARS e AIDS.
Il gene responsabile della funzione di fusione in Sars-CoV-2 non è stato trovato in altri coronavirus nell'uomo o negli animali. "
E i media cinesi fanno riferimento all'articolo rapidamente ritirato da 10 ricercatori di laboratorio di livello BL3.
Per rispondere a questa domanda, abbiamo valutato la suscettibilità dei linfociti T all'infezione da SARS-CoV-2. Per fare ciò, gli pseudotipi SARS-CoV e SARS-CoV-2 sono stati confezionati in base ai metodi descritti in precedenza. Lo pseudovirus potrebbe infettare cellule permissive (cellule 293T / ACE2 e Huh7) che esprimono il recettore ACE2, ma non potrebbe infettare cellule non permissive (cellule HeLa). Abbiamo utilizzato lo pseudovirus con infettività pari a cellule 293T / ACE2 per infettare due linee cellulari di linfociti T, MT-2 e A3.01, con un livello di espressione di mRNA molto basso o quasi negativo. hACE2.
Sorprendentemente, durante diverse scosse di assestamento, abbiamo scoperto che le linee cellulari T erano significativamente più suscettibili all'infezione da SARS-CoV-2 rispetto a SARS-CoV (Fig. 1c ). In altre parole, questi risultati ci dicono che le cellule T possono essere più permissive per l'infezione da SARS-CoV-2 e meno permissive per l'infezione da SARS-CoV, simili ai risultati di uno studio precedente. . Pertanto, è plausibile che la proteina S di SARS-CoV-2 possa fornire una potente infettività anche su cellule che esprimono un basso livello di hACE2, il che a sua volta spiegherebbe perché la velocità di trasmissione diSARS-CoV-2 è così alto. È anche possibile che altri recettori che mediano l'ingresso di SARS-CoV-2 nei linfociti T, come CD147, si trovino sulla superficie dei linfociti T, che è stato recentemente segnalato come una nuova via invasiva per la SARS- CoV-2.
Sulla base dei risultati dell'infezione da pseudovirus e virus vivi, qui abbiamo dimostrato che (1) SARS-CoV-2 può infettare le cellule T , (2) le cellule T infettate con SARS-CoV- 2 dai recettori di fusione di membrana dipendenti, fusione di membrana con S a base di proteine e (3) l'infezione può essere inibita dal peptide EK1.
Tuttavia, le 2 sequenze di HIV presenti in Sars-Cov2 sono specificamente attaccate al “legame ” e alla “ fusione di membrana ” i 2 stadi iniziali della contaminazione. Sapendo che il 3 ° gradino, la scollatura, dipende in gran parte per Sars-cov2 dalla sequenza "furin", anch'essa unica per Sars-cov2.
Anche gli autori, in considerazione dell'elevato numero di manipolazioni di inserti e campioni che hanno avuto luogo in così tanti paesi e ambiente BL2 e / o BL3 sulle fasi di " legame, fusione di membrana, scissione ", non possono logicamente ignorare che ci sia “ Statisticamente ” tanto e probabilmente più probabile che Sars-Cov2 possa essere apparsa per manipolazione dell'RNA piuttosto che per evoluzione naturale, molto probabilmente per lo scopo legittimo di sviluppare trattamenti e vaccini e contaminare accidentalmente la popolazione da un laboratorio.
Anche altri punti clinici della SARS-2 sembrano descrivere una " doppia vita della SARS2 ".
Normalmente il sistema immunitario umano gioca su 2 tipi di proteine per " modificare il patogeno " e quindi combatterlo: ADAR che edita a livello di RNA e ABOPEC che agisce a livello di DNA. Questo articolo sottolinea che è raro vedere la " modifica " di ssRNA da parte di ABOPEC.
Ma l'abbiamo visto con COVID19. Lo descrive uno studio italiano :
" I nostri risultati suggeriscono che l'APOBECs e ADAR sono coinvolti nella edizione del genoma del coronavirus, un processo che può plasmare il destino del virus e il paziente . "
La frase più importante è che "l' editing di ABOPEC " avviene a livello del DNA intermedio e non più dell'unico RNA messaggero.
“ Durante le infezioni virali, gli ADAR agiscono direttamente, per ipermutazione dell'RNA virale, o indirettamente, modificando le trascrizioni dell'ospite che modulano la risposta cellulare. D'altra parte, gli APOBEC prendono di mira il genoma virale, generalmente intermedi del DNA, o per ipermutazione C-U o per un percorso non enzimatico che interferisce con la trascrizione inversa. "
E quale virus utilizza principalmente l'editing ABOPEC? HIV-1 .
In ogni caso, capiremmo allora la ragione "nascosta" della composizione molto positiva all'HIV dei "2 comitati scientifici " in Francia e una " pseudo pericolosità di HCQ " ma oltre a quella di Qt, anche una "preoccupazione " per le mutazioni. e ricombinazioni di sequenze di RNA in vivo.
Quello che lo Stati Uniti " sa anche " .
Quanto sono simili l'HIV e la SARS-CoV-2?
Alcuni studi recenti sugli effetti dell'HIV e della SARS-CoV-2 indicano che hanno alcune somiglianze. I ricercatori di Shanghai hanno fornito prove che SARS-CoV-2 può infettare i linfociti T, le stesse cellule prese di mira dall'HIV.
Altri ricercatori hanno documentato che le persone con COVID-19 grave possono presentare linfopenia o un numero tipicamente basso di linfociti nel sangue. Anche l'infezione da HIV causa questa anomalia, causando alla fine l'immunosoppressione associata all'AIDS ".
Pur riconoscendo che la linfopenia può derivare da altre cause: “E la linfopenia osservata? In uno studio su persone morte a causa di COVID-19, i ricercatori hanno notato che la quantità di linfociti nel sangue è diminuita costantemente durante il decorso della malattia. Al contrario, altri marcatori del sangue standard, come il numero di globuli rossi, sono rimasti abbastanza costanti. Questa osservazione significa che l'infezione da SARS-CoV-2 porta all'immunosoppressione, come l'HIV? Non necessariamente. Gli autori fanno notare che diversi fattori potrebbero portare alla linfopenia. "
Ricordando che i vaccini "standard" hanno fallito su Sars-cov1, MERS e HIV, il che suggerirebbe che solo una "nuova tecnologia, qui mRNA" avrebbe una possibilità di essere efficace: "Sfortunatamente, ci sono anche cattive notizie. I tentativi di sviluppare un vaccino contro la SARS-CoV-1 in seguito all'epidemia di SARS del 2003 non hanno avuto successo. Diversi vaccini candidati hanno dimostrato di essere relativamente efficaci quando testati sugli animali. Ma gli animali vaccinati hanno anche mostrato una grave immunopatologia: il vaccino sembrava aver causato l'iperattività del sistema immunitario degli animali e causare loro più danni. Più recentemente, i ricercatori hanno anche dimostrato che un candidato vaccino contro MERS-CoV offriva protezione ai topi contro il virus, ma poteva anche causare lo stesso tipo di grave danno al loro sistema immunitario. "
Si noti che "anche l' Unione europea lo sapeva" poiché ha cofinanziato lo studio del 2008 del dottor Zheng-Shi Li .
"Questo lavoro è stato finanziato congiuntamente da un programma statale chiave per una borsa di ricerca di base (2005CB523004) del Ministero cinese della scienza e della tecnologia, un fondo speciale del presidente dell'Accademia cinese delle scienze (n. 1009) , il progetto chiave del Knowledge Innovation Program dell'Accademia cinese delle scienze (KSCX1-YW-R-07) a Z. Shi, il sesto programma quadro "EPISARS" della Commissione europea , una sovvenzione del National Nature Science Foundation of China for Creative Research group (30421004) presso H.Deng e l'Australian CRC on Biosafety for Emerging Infectious Diseases (progetto 1.026RE) presso L.-F. Wang. "
“In questo studio, abbiamo studiato l'uso dei recettori SL-CoVS combinando un sistema di pseudovirus basato sul virus dell'immunodeficienza umana con linee cellulari che esprimono le molecole ACE2 di pipistrello umano, zibetto o ferro. cavallo '
Oltre alla S completa di SL-CoV e SARS-CoV, una serie di chimere S è stata costruita inserendo diverse sequenze di SARS-CoV S nella spina dorsale di SL-CoV S. Diverse importanti osservazioni sono state fatte a da questo studio. In primo luogo, SL-CoV S non può utilizzare nessuna delle tre molecole ACE2 come recettore. In secondo luogo, SARS-CoV S non è entrato nelle cellule che esprimono il pipistrello ACE2. In terzo luogo, la S chimerica che attraversa il dominio di legame del recettore precedentemente definito ha acquisito la sua capacità di entrare nelle cellule tramite ACE2 umano, ma con efficienze diverse per diversi costrutti. Quarto, una regione di inserzione minima (amminoacidi 310-518) è stata trovata sufficiente per convertire SL-CoV S non legante ACE2 in legame ACE2 umano. "
Il più interessante di questo studio è altrove
“In questo studio, è stato utilizzato un sistema di pseudovirus basato sul virus dell'immunodeficienza umana (HIV) per affrontare questi problemi. "
Tutte le sezioni precedenti mostrano che tutti i paesi , con i loro centri scientifici più competenti , hanno lavorato e scambiato tra loro i numerosi programmi e campioni di "lentivirus" dove "HIV, SARS, EBOLA" sono stati combinati su manipolazioni di laboratorio, per scopi legittimi, dove le manipolazioni di brevi sequenze di RNA erano " lo strumento genetico più avanzato". "
Gli autori non traggono alcuna conclusione su questi fatti, ma notano solo che per SARS-Cov1 e SARS-Cov2 ci sono molti studi che contraddicono e la scelta ufficiale dell '" ospite intermedio " (zibetto per Sars-Cov1 e pangolino e RagT13 per Sars-cov2) e menzionare le analogie genomiche (sequenze di HIV) e cliniche (cellule CD4) che consentono di presentare l'opzione che statisticamente in 20 anni ci sono probabilmente più possibilità che Sars-cov2 derivi da " incidente non intenzionale ”rispetto alle ricombinazioni su diversi animali .
Si noti inoltre che l' ANRS Francia (qui Mr Delfraissy) e gli NIH USA collaborano da molto tempo
E la Germania ha acquisito a lungo tutta la competenza senza parlarne troppo: “ Vaccini a mRNA combinano proprietà immunologiche desiderabili con un profilo di sicurezza eccezionale e la flessibilità insoddisfatta dei vaccini genetici. Sulla base dell'espressione della proteina in situ, i vaccini a mRNA sono in grado di indurre una risposta immunitaria equilibrata, inclusa l'immunità cellulare e umoristica, pur non essendo soggetti alla restrizione dell'aplotipo MHC. Inoltre, l'mRNA è un vettore intrinsecamente sicuro, in quanto è un trasportatore minimo e transitorio di informazioni che non interagisce con il genoma. Poiché qualsiasi proteina può essere espressa dall'mRNA senza la necessità di regolare il processo di produzione, i vaccini a mRNA offrono anche la massima flessibilità nello sviluppo. Nel suo insieme, L'mRNA presenta un vettore promettente che potrebbe benissimo diventare la base di una piattaforma tecnologica per i vaccini rivoluzionaria. Qui descriviamo le attuali conoscenze riguardanti i diversi aspetti che dovrebbero essere presi in considerazione quando si sviluppa una tecnologia vaccinale basata su mRNA.. "
L' mRNA BioNtech , azienda tedesca (con Pfizer) quindi non arriva dal nulla.
Effetti clinici " la doppia vita di sars-cov2 "
Le sequenze HIV-1 gp41 e gp120, naturali o manipolate in laboratorio, esistono in Sars-cov2. Ricordiamo che la sequenza gp41 trova la sua funzione nell'attaccamento (normalmente cellula T se HIV-1) e gp120 nella fusione di membrana con la cellula attaccata dal virus.
Sars-cov2 avendo ACE2 come recettore primario, le 2 sequenze di HIV dovrebbero essere " inattive " per Sars-cov2.
Tuttavia, nella sezione precedente, le analogie cliniche tra HIV-1 e Sars-cov2 sono particolarmente rilevanti nella fase grave , ovvero il passaggio alla fase infiammatoria acuta e il runaway del sistema immunitario.
Un cosiddetto effetto ADE (Anticorpo dipendente dal potenziamento) è stato studiato su SARS-Cov2 ;
“ Uno degli obiettivi principali del vaccino e dello sviluppo terapeutico è generare anticorpi che impediscano l'ingresso di SARS-CoV-2 nelle cellule bloccando le interazioni di legame ACE2 - RBD o la fusione di membrana mediata da S.
Un potenziale ostacolo per i vaccini e le terapie a base di anticorpi è il rischio di esacerbare la gravità del COVID-19 tramite il potenziamento dipendente dall'anticorpo (ADE). L'ADE può aumentare la gravità di più infezioni virali, inclusi altri virus respiratori come il virus respiratorio sinciziale (RSV) 9 , 10 e il morbillo 11 "
“ Nel secondo meccanismo ADE descritto, che è meglio esemplificato dai patogeni respiratori, le funzioni effettrici dell'anticorpo mediate da Fc possono migliorare la malattia respiratoria avviando una potente cascata immunitaria che si traduce in una patologia polmonare osservabile 20 , 21 . L'attivazione mediata da Fc di cellule immunitarie innate locali e circolanti come monociti, macrofagi, neutrofili, cellule dendritiche e cellule natural killer può portare a un'attivazione immunitaria disregolata nonostante la loro potenziale efficacia nell'eliminazione di cellule infettate da virus e detriti »
"I dati degli studi su SARS-CoV e altri virus respiratori suggeriscono che gli anticorpi anti-SARS-CoV-2 possono esacerbare COVID-19 attraverso il potenziamento anticorpo dipendente (ADE) "
“ Uno degli obiettivi principali del vaccino e dello sviluppo terapeutico è generare anticorpi che impediscano l'ingresso di SARS-CoV-2 nelle cellule bloccando le interazioni di legame ACE2-RBD o la fusione di membrana 100.000 S.
Una potenziale barriera per i vaccini e le terapie a base di anticorpi è il rischio di esacerbare la gravità del COVID-19 attraverso il potenziamento anticorpo-dipendente (ADE). L'ADE può aumentare la gravità di più infezioni virali, inclusi altri virus respiratori come il virus respiratorio sinciziale (RSV) e il morbillo. "
" Nel secondo meccanismo descritto di ADE, che è meglio esemplificato dai patogeni respiratori, le funzioni effettrici dell'anticorpo fc-21 possono aumentare la malattia respiratoria avviando una potente cascata immunitaria che si traduce in una patologia osservabile di polmone . L'attivazione di Fc di cellule immunitarie innate locali e circolanti come monociti, macrofagi, neutrofili, cellule dendritiche e cellule natural killer può portare ad un'attivazione immunitaria disregolata nonostante la loro potenziale efficacia nell'eliminazione di cellule e detriti infettato dal virus '
È disponibile uno studio più completo sull'ADE .
Questo effetto potrebbe potenzialmente spiegare la rapida transizione alla fase grave del bersaglio immunitario debole; anziani e / o con comorbilità; mentre per il + 95% della popolazione il sistema immunitario reagisce correttamente quando la carica virale è ancora nel sistema respiratorio "alto"
Tuttavia, senza trarre alcuna conclusione, esiste un effetto equivalente per altri virus
“ Queste funzioni effettrici basate su anticorpi sono state implicate nella protezione e nel controllo di molti virus, inclusi i virus dell'influenza , il virus Ebola (EboV) e il virus dell'immunodeficienza umana (HIV-1) . "
Tuttavia, è spiegato per l'HIV-1, il virus più studiato e utilizzato;
La glicoproteina del trimero dell'involucro dell'HIV-1 (Env) è derivata dalla scissione proteolitica di un precursore trimerico della gp160 [46,47] ed è composta dalle subunità esterne gp120 e gp41 transmembrana. Shed gp120 può interagire con i recettori CD4 sulla superficie cellulare dei passanti non infetti . È ormai ben stabilito che l'interazione di gp120 con CD4 è essenziale per l'esposizione di epitopi altamente conservati per anticorpi mediatori di adcc. Pertanto, il legame di gp120 shed ai recettori CD4 su cellule T CD4 + non infette reindirizza le risposte ADCC dalle cellule infettate in modo produttivo alle cellule spettatore. Inoltre, i test in vitro dell'ADCC possono essere fortemente influenzati dal riorientamento dell'ADCC verso funzioni CD4 + T non infette come il secondo meccanismo descritto di ADE che è meglio esemplificato dai patogeni respiratori, Le funzioni effettrici dell'anticorpo mediate da fc possono aumentare la malattia respiratoria avviando una potente cascata immunitaria che si traduce in ll di patologia polmonare osservabile. "
“Le preoccupazioni sono state sollevate per la prima volta per l'ADE nei pazienti con SARS quando si è scoperto che le risposte alla sieroconversione e alla neutralizzazione degli anticorpi erano correlate alla gravità clinica e alla mortalità46. Una conclusione simile è stata riportata nei pazienti Covid-19, con i titoli più alti di anticorpi contro SARS-CoV-2 è associato a una malattia più grave. "
Sono necessari ulteriori studi per spiegare questo effetto, ma possiamo vedere solo una cosa, a parte lo studio Lancet del dottor Mehra su HCQ ritirato a maggio / giugno 2020, solo 2 articoli sono stati ritirati:
- il giornale indiano che aveva identificato la sequenza HIV- + gp120 in Sars-cov2,
- il documento della Fudan University che ha spiegato come Sars-Cov-2 ha attaccato i linfociti T in fase grave.
In altre parole, i 2 documenti che, implicitamente e presi insieme, sembravano dire:
"Le sequenze HIV gp41 e gp120 in Sars-cov2, normalmente inattive sulla loro funzione di base " attaccamento e fusione " perché non associate ad ACE2, bersaglio di Sars-Cov2, da un effetto indiretto sugli anticorpi attivati contro l'infezione da Sars-cov2 , potrebbe trovare nelle persone con un'immunità debole “ il ruolo dell'HIV come effetto ADE. "
Una logica molto fattuale che può portare alla modifica del titolo dell'articolo :
- Ricordiamo la storia di oltre 20 anni che ha portato al trittico “HIV-1, gp41 + gp120, coronavirus” praticamente generalizzato, indiscusso e provato.
- Si osserva quindi che residui di gp41, gp120, sequenze di furin (cioè la contaminazione da HIV-1) sono presenti in Sars-cov2 ( e questo non importa cosa sia successo, è reale ).
- Notiamo che negli ultimi 20 anni gli scienziati non sono mai stati in grado di "domare la gp120 dell'HIV-1" che ha sempre saputo "dirottare" le soluzioni degli scienziati.
Di conseguenza, il collettivo di cittadini ha il diritto di porre la domanda legittima agli scienziati:
"Potete garantire che questi residui di sequenze di HIV-1 gp41 e gp120 (e furin) in Sars-cov2 non possono avere alcun effetto deleterio di" tipo HIV-1 " per alcuni contaminati da Sars-cov2 (il più immunodeficiente"
La richiesta dei cittadini è totalmente fondata e legittima sul fatto che “troviamo” solo le 3 sequenze chiave dell'HIV-1 e quando vediamo gli effetti clinici della SARS identici agli effetti clinici dell'HIV-1, documentati dagli States Uniti e Cina per casi gravi. Volontariamente il collettivo di cittadini rimane sui fatti citando molti riferimenti. Questo per evitare completamente un pezzo di opinione.
La logica puramente fattuale consiste nel convincere gli scienziati a "invertire la richiesta di prove". Non stiamo chiedendo di dimostrare se queste sequenze sono presenti naturalmente o mediante manipolazione (a rischio di rifare il passato e riscrivere la vita del pangolino o dello zibetto) ma queste sequenze di HIV-1 sono lì, che gli scienziati ci dicono "se loro può o non può avere effetti ” .
Il ruolo degli scienziati è quello di rispondere a questa domanda, concentrandosi sul terreno fattuale e attuale (le sequenze dell'HIV nella Sars). Sarebbe difficile per loro dire "non sappiamo cosa possono fare" poiché hanno accumulato esattamente 20 anni di esperienza per gp41 e gp120 sui coronavirus per sviluppare un vaccino contro l'HIV.
Il titolo dell'articolo potrebbe essere cambiato per aggiungere "effetti gp41 e gp120, signori scienziati, rispondete".
E la Francia in tutto questo
La Francia ha sempre avuto una forte esperienza in materia di HIV e AIDS, in particolare attraverso l'Institut Pasteur Paris . Tuttavia, l'esperienza su HIV, SARS e mRNA dell'Institut Pasteur Paris è praticamente passata sotto il controllo di Pasteur Shanghai, Pasteur Hong-Kong e / o concedendo in licenza brevetti ad attori privati.
Su contratto, i nostri concittadini saranno ancora una volta sorpresi nello scoprire che l' Institut Pasteur Paris si è "associato" nel 2015 a Moderna, che ha richiesto l'autorizzazione per il suo vaccino mRNA contro COVID19.
Inoltre, il presidente dell'unità di investimento Valera de Moderna , che sovrintende a questi studi congiunti tra Institut Pasteur e Moderna, ha lavorato per 14 anni a Sanofi Paris e Lyon ed è stato anche per 2 anni, scienziato presso Sanofi e membro del Consiglio. di Moderna Svizzera , prima di entrare definitivamente in Moderna negli Stati Uniti.
Allo stesso modo, l'Institut Pasteur Paris aveva “trasferito” 9 rami dei suoi brevetti alla società francese Cellectis, attiva nella manipolazione del DNA . Cellectis ha quindi acquisito il 67% di un'azienda, attiva a priori nell'agrobiotecnologia per poter condurre sperimentazioni cliniche al di fuori della Francia, in questo caso Stati Uniti e Regno Unito sui prodotti per uso umano al punto che '' nel 2020 Cellectis annuncia:
“ Il 4 marzo 2020 abbiamo annunciato la firma di un emendamento al contratto di licenza, sviluppo e marketing con Les Laboratoires Servier (Servier). Secondo i termini di questo emendamento, Cellectis ha concesso a Servier una licenza esclusiva estesa a livello mondiale per sviluppare e commercializzare, direttamente o tramite il suo sub-licenziatario negli Stati Uniti, Allogene Therapeutics , tutti i prodotti allogenici di nuova generazione destinati Antigene CD19 basato su cellule CAR-T allogeniche geneticamente modificate, inclusi i diritti su UCART19 / ALLO-501 e ALLO-501A. ALLO-501A è un prodotto candidato anti-CD19in cui sono state eliminate le aree riconoscibili da rituximab.
I termini finanziari di questo pilota sono stati migliorati per includere un pagamento anticipato aggiuntivo di 27,6 milioni di dollari, o 25 milioni di euro, oltre a pagamenti per traguardi di sviluppo clinico e commerciale fino a 410 milioni di dollari. dollari, o 370 milioni di euro. Il tasso di royalty sulle vendite nette dei prodotti commercializzati è stato rivalutato da un tasso di incremento a una cifra (superiore dell'intervallo) a un tasso fisso a due cifre (inferiore dell'intervallo) . "
Un punto interessante è che Allogene Therapeutics è stata fondata dai fondatori di Kite Therapeuthics acquisita da Gilead.
Il mondo è piccolo e la concorrenza feroce in questo mondo di biogenetica.
Su SARS-COV2, le conoscenze dell'Institut Pasteur possono essere trovate a Pasteur Hong-Kong e Pasteur Shanghai
Dobbiamo già notare che nel 2020 Pasteur Shanghai sta rapidamente unendo le forze con le autorità cinesi per difendere l'origine naturale della SARS-COV2
Prima della "pedalata parziale " 40 giorni dopo:
Si noti che nel 2015, dopo il paper del Dr Zheng-Li Shi e Ralph Baric, l'Institut Pasteur di Parigi non ha escluso, in considerazione del numero di studi e di campioni genetici nei laboratori, una fuoriuscita accidentale di un virus in un laboratorio dato il numero di team che sviluppano "virus ingegnerizzati" trasmissibili agli esseri umani
“Ma altri virologi si chiedono se le informazioni raccolte dall'esperimento giustifichino il potenziale rischio. Sebbene l'entità di qualsiasi rischio sia difficile da valutare, Simon Wain-Hobson, virologo presso l'Institut Pasteur di Parigi, sottolinea che i ricercatori hanno creato un nuovo virus che "cresce notevolmente bene" nelle cellule umane. "Se il virus sfuggisse, nessuno potrebbe prevedere la traiettoria ", dice.
Si noti che 3 francesi siedono nel Consiglio di amministrazione di Pasteur Shanghai
Per quanto riguarda la gestione di Pasteur Shanghai, tutto viene detto dallo stesso Direttore: Xia Jin, MD, PhD
"Xia Jin, MD / PhD, è attualmente Professore e Principal Investigator e Direttore Esecutivo del Vaccine Center presso il Pasteur Institute di Shanghai (IPS), Accademia cinese delle scienze. Successivamente è stato assistente (2001-2006) e professore associato (2007-2012) presso l'Università di Rochester, Rochester, New York, prima di entrare in IPS nel 2012. Ha conseguito una laurea in medicina dopo aver completato il d 8 anni di studi al Peking Union Medical College, poi dottorato in immunologia virale presso la Open University sotto la guida del professor Sir Patrick Sisson della Cambridge University Clinical School in Inghilterra. La sua formazione post-laurea è stata completata con i dottori Richard A. Koup e David D. Ho, rispettivamente, presso l'Aaron Diamond AIDS Research Center di New York. Mentre si lavora negli Stati Uniti, ha servito come un investigatore principale o co-investigatore in aggiunta 20 borse di ricerca da NIH e Melinda & Gates Foundation. È stato membro di molte sezioni di studio dei NIH, nonché revisore esperto internazionale per agenzie di ricerca nei Paesi Bassi, Hong Kong, Taiwan e Singapore. È stato presidente (HVTN-064, HVTN-083) e co-presidente (HVTN-063 e HVTN-094) dello studio clinico di fase I sul vaccino contro l'HIV condotto dal NIH / NIAID HVTN. È scrittore accademico di PLoS ONE e membro del comitato editoriale di JAIDS . Il suo laboratorio sta lavorando sull'immunologia dell'HIV e del virus della dengue e sullo sviluppo di vaccini. Ha pubblicato oltre 80 articoli SCI su Science, J Exp Med, J Clin Inv, J Immunol, J Virol, J Inf Dis, AIDS, Retrovirology, Vaccine, ecc., Incluso un documento altamente citato (Jin et al. , J Exp. Med., 1999) in PubMed (462 volte) "
Nel 2007 nel suo rapporto Pasteur Shanghai ha dettagliato i suoi obiettivi :
1) Programmi di collaborazione con ospedali e organizzazioni di sanità pubblica (Accademia cinese delle scienze mediche, Centers for Disease Control, Shanghai Bureau of Public Health).
2) Struttura biologica basata su particelle virali pseudotipizzate derivate dal lentivirus per eseguire ricerche fondamentali sull'interazione virus-cellula, ingresso e morfogenesi, stabilità del virus e per applicazioni ad alto rendimento nei saggi antivirali di titolazione anticorpi o neutralizzatore.
3) Struttura di biologia basata sulla produzione di ovociti di rana e microiniezione di RNA per studiare l'interazione delle proteine con le membrane cellulari ed in particolare i meccanismi dei canali ionici con applicazione allo screening dei farmaci antivirali.
E più in particolare: “Progetto RNA Polymerase: la malattia virale è causata dall'interazione tra un virus e un ospite. La replicazione del virus è essenziale per causare la malattia e la polimerasi virale è essenziale per la replicazione virale. Crediamo che le polimerasi virali controllino la replicazione virale e la loro patogenesi. Il nostro gruppo si concentra sulla dissezione molecolare (biologia molecolare e strutturale) di RNA polimerasi virali da tutti i virus a RNA (RNA negativo, positivo e a doppio filamento) inclusa la trascrittasi inversa dell'epatite B e dei virus umani. immunodeficienza. Sulla base dei nostri dati, progetteremo polimerasi e virus. "
Il know-how e le tecniche genetiche di Pasteur France sull'HIV sono stati trasferiti a Pasteur Shanghai
Obiettivo 3: Immunogeni particelle simili a lentivirus (LVLP) contro i virus HIV e H5N1 HPAI:
La vaccinazione è un modo conveniente per combattere il potenziale focolaio del virus HPAI H5N1. Per sviluppare immunogeni contro molte sotto cladi dei virus HPAI H5N1, abbiamo progettato tre lentivirus simili a particelle (LVLP) contenenti lo stesso nucleo di HIV e N1NA , ma diversi H5HA sulla loro superficie. Abbiamo dimostrato che LVLP che esprimono HA e NA sono immunogenici. Il sistema immunitario sarà ottenuto con LVLP che esprime il clade 1 di H5HA neutralizza efficacemente i tipi pseudo lentivirali che esprimono clade 0 e 1, ma neutralizza scarsamente il clade 2 di H5HA; mentre i sieri immuni ottenuti con LVLP che esprime H5HA sub-lade 2.3 neutralizza efficacemente i tipi pseudo lentivirali che esprimono subclades 2.1 e 2.3, neutralizza il clade 0 in modo meno efficiente, ma neutralizza scarsamente il clade 1 di H5HA. Al contrario, i sieri immuni ottenuti con LVLP che esprimono sia il clade 1 che la sotto clade 2.3 di H5HA neutralizzano efficacemente i tipi pseudo lentivirali che esprimono (sub) cladi 0, 1, 2.1 e 2.3 di tutti gli 8 H5HA e H1HA isolati. gli esseri umani. Pertanto, questi risultati dimostrano il potenziale degli LVLP che esprimono sia il clade 1 che la sotto clade 2. 3 di H5HA per ottenere un'ampia protezione immunitaria contro molti cladi dei virus HPAI H5N1. Attualmente, in collaborazione con i ricercatori dell'Institut Pasteur in Cambogia, stiamo per realizzaresfida per testare l'efficacia in vivo degli immunogeni LVLP. "
"Il completamento del ciclo di vita dell'HIV-1 comprende le seguenti fasi: attaccamento virale e fusione con cellule bersaglio, stripping, trascrizione inversa in cDNA, importazione nucleare e integrazione di cDNA, trascrizione di mRNA virale, splicing e esportazione nucleare di questi mRNA, traduzione virale e trasporto di proteine per assemblaggio, germogliamento virale e maturazione. Una conoscenza approfondita di come l' HIV-1 manipola i meccanismi dell'ospite durante l'infezione virale può facilitare l'identificazione dei bersagli dell'ospite per i farmaci antivirali o la terapia genica. "
Più interessante nel 2020 la realtà "mRNA and the vaccine" e la collaborazione Pasteur Shanghai, Fudan University e Chinese Academy of Sciences Shanghai:
"Con il rapido sviluppo della ricerca sulla biologia dell'RNA, la stabilità dell'mRNA e l'efficienza della sua somministrazione sono state notevolmente migliorate. La tecnologia del vaccino 25MRNA è stata applicata allo sviluppo di vaccini per molte malattie infettive, tra cui il virus dell'influenza , l' HIV, il virus Zika (ZIKV) e il virus Ebola. Rispetto ai vaccini a DNA, i vaccini a mRNA non possono integrarsi nel genoma dell'ospite, evitando così il rischio di mutagenesi inserzionale e potenziale oncogenesi. Il vaccino mRNA comprende generalmente un 50cap, un 50UTR, un gene che codifica uno o più antigeni, un 30UTR e una coda poli (A); esprime proteine di diverso tipo, come la trans membrana, la secrezione o l'intracellulare. È importante sottolineare che l' mRNA modificato può non solo aumentare l'immunità innata. "
E l'Università di Fudan stava lavorando fianco a fianco con il centro BL3 di Wuhan.
"Il 3 gennaio, Zhang Yongzhen , assistente professore presso lo Shanghai Public Health and Clinical Center affiliato alla Fudan University , un centro designato per il trattamento di tutti i pazienti adulti con COVID-19 diagnosticato a Shanghai, ha ricevuto un campione di un paziente con febbre di origine sconosciuta e passata esposizione a un mercato del pesce a Wuhan. È stato uno dei tanti campioni che il team di Zhang ha ricevuto dal Wuhan Central Hospital come parte di un programma congiunto negli ultimi anni . "
Anche operativamente troviamo Pasteur Shanghai in molti progetti in Cina. Pasteur, attraverso uno spin-off francese, sviluppa vettori di lentovirus a Shanghai dal 2011 .
“Jinwei ( http://www.jinweibio.com/en/ ) è una società di biotecnologia che lavora in collaborazione con Theravectys –Francia, uno spin-off dell'Institut Pasteur. La nostra piattaforma si basa su una tecnologia vettoriale lentivirale avanzata brevettata. L'obiettivo di Jinwei è sviluppare servizi di vettore lentivirale personalizzati per soddisfare le richieste di un mercato sanitario sempre più esigente. In qualità di azienda biotecnologica, sviluppiamo vaccini terapeutici non auto-T per pazienti con cancro e altre importanti malattie infettive. Forniamo anche un sistema Vettore virale sicuro e affidabile per l'applicazione della terapia cellulare CAR-T come produttore a contratto. "
Curiosamente, il vettore virale CAR-T è esattamente ciò che fa Cellectis, un'azienda francese con brevetti Pasteur. È stato anche Pasteur Shanghai a creare il fondo VC per investire in società cinesi:
Nel 2018 Pasteur Shangai viene premiata per importanti risultati:
" IPS ha sviluppato con successo il vaccino contro le proteine zika ricombinanti nel marzo 2017. Ha inoltre firmato un accordo di partnership con Chongqing Zhifei Biological Products Co. per lo sviluppo e l'industrializzazione del" vaccino ingegnerizzato contro il virus Zika. ".
Più sorprendente
“L'istituto metterà un farmaco e un vaccino di prima classe nella sperimentazione clinica di fase I questo mese. È il vaccino tetravalente per l'enterovirus destinato alle malattie intestinali, mentre il nuovo farmaco è un farmaco anti-malaria , ha rivelato "
L'artemisinina attualmente utilizzata per combattere la malaria ha costruito la tolleranza, mentre il nuovo farmaco, con un nuovo punto di mira e un nuovo meccanismo, porterà buone notizie agli oltre 300 milioni di pazienti recentemente infettati in tutto il mondo ogni anno " Tang ha detto.
Senza alcun giudizio, già nel 2018, il professor Raoult e il professor Perronne ovviamente non erano " dalla parte di Pasteur Shanghai " nei trattamenti.
Di passaggio apprendiamo anche che Pasteur Shanghai è " la scatola della PI e dei brevetti "
“Oltre a commercializzare i risultati di ricerca e sviluppo, la protezione della proprietà intellettuale è anche al cuore della dell'Institut Pasteur. "Abbiamo un team speciale per lo sfruttamento della proprietà intellettuale e collaboriamo con le migliori società di brevetti del paese per rafforzare la nostra capacità di proteggere e sfruttare i diritti di proprietà intellettuale", ha detto Tang a Yicai Global.
Nel 2019 Pasteur Shanghai ottiene l'autorizzazione al test per un vaccino contro " l'influenza gastrica ".
E, (ma è una sorpresa), Pasteur Shanghai è all'inizio del 2020 impegnato in un vaccino a mRNA
"(Yicai Global) 18 giugno - Il produttore cinese di vaccini Ab & b Bio-Tec e un istituto di sanità pubblica dell'Accademia cinese delle scienze uniranno le forze per fornire un'inoculazione genetica più rapida di Covid-19 per utilizzo in tutto il mondo.
Ab & b Bio-Tec e l'Institut Pasteur di Shanghai hanno firmato un accordo di cooperazione per sviluppare e produrre vaccini contro il nuovo tipo di coronavirus, ha detto CAS in un comunicato stampa rilasciato ieri.
I vaccini genetici sono programmati per aiutare il corpo a produrre anticorpi contro i virus invece di utilizzare virus vivi o indeboliti per innescare questa risposta del sistema immunitario. Questo è il motivo per cui il loro processo di sviluppo è più veloce. Questi tipi di vaccini possono essere facilmente prodotti in serie e hanno una lunga durata, secondo il CAS. "
Si tratta di un " inoculo COVID geneticamente modificato e basato su geni". "
Per quanto riguarda Pasteur Hong-Kong, troviamo nel suo rapporto del 2007:
“ Un secondo progetto finanziato da RFCID indaga il ruolo del potenziamento degli anticorpi nella patogenesi della SARS. In vitro studi hanno dimostrato che gli anticorpi specifici indotti sia da virus dall'animale all'uomo (per esempio in pazienti con SARS) o di vaccini SARS (da animali vaccinati con vaccini contro putativi SARS). SARS) può facilitare l'ingresso di SARS-CoV in linee di cellule B umane che sono altrimenti refrattarie al virus (in assenza di tali anticorpi) perché queste cellule B mancano del recettore ACE2 necessario per l'ingresso virale. Tali anticorpi potenzianti possono potenzialmente portare a linfopenia , che è una caratteristica notevole della SARS. Questo è anche di grande importanza come possibile conseguenza indesiderata di un potenziale vaccino contro la SARS . "
E uno studio del 2006 che includeva Pasteur HK conferma i loro primi lavori sulla SARS:
Pasteur Hong-Kong nel 2012 ha così pubblicato sullo sviluppo del vaccino contro Sars-cov1 :
Una sezione è particolarmente preveggente
“Delle quattro principali proteine strutturali della SARS-CoV, la glicoproteina dell'involucro Spike (S) è l'antigene neutralizzante e protettivo più importante della SARS-CoV. Il legame della proteina Spike al suo recettore dell'enzima di conversione dell'angiotensina 2 (ACE2) è responsabile dell'ingresso di SARS-CoV nelle cellule. Le strategie vaccinali per bloccare / limitare l'infezione da SARS-CoV si concentrano principalmente sul targeting del picco di glicoproteina virale. Tuttavia, una tale strategia pone un singolare dilemma per i coronavirus, perché i precedenti protocolli di vaccinazione hanno evidenziato la possibilità di un miglioramento della malattia sotto l'aspetto immunitario. "
"I meccanismi basati sull'immunità, in particolare il potenziamento dipendente da anticorpi (ADE), sono stati sfruttati da una varietà di virus, tra cui il virus dengue, il coronavirus felino (FCoV) e l'HIV, come strategie alternative per infettare le cellule ospiti. 2,3 Oltre all'interazione tra proteine virali e recettori dell'ospite, questi virus possono entrare nelle cellule legando virus / immunocomplessi al recettore Fc (FcR), recettore complementare o inducendo un cambiamento conformazionale nelle glicoproteine dell'involucro necessario per la fusione della membrana cellulare virale. "
Un centro di classe mondiale di eccellenza, intorno Fudan University e Pasteur di Shanghai, su vaccini e inserti genetici mRNA con l'obiettivo di combattere l'HIV, Ebola, malaria , ecc, è esistito per 20 anni a Shanghai ed è stata consolidata nel competenza sul coronavirus della dott.ssa Zhang-Shi Li (laboratorio BL3 di cui è direttrice, che non è al P4) a Wuhan.
Questo articolo è stato modificato il 4 gennaio 2021 per aggiungere dettagli su GP41 e GP120
Autori: Le Collectif Citoyen pour France
Fonte: FranceSoir
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